目的:通過(guò)兩種不同方法觀(guān)察卡式血型檢測方法在臨床ABO、RhD血型定型中的應用效果。方法 采用血凝法與卡式法兩種ABO、RhD血型定型卡式檢測方法同時(shí)平行進(jìn)行進(jìn)行比較。
結果:(1)ABO血型定型350例中兩種方法檢測結果完全相同,但其中3例血凝法凝集效價(jià)(++);(2)RhD血型定型350例中兩種方法結果一致。結論 ABO、RhD血型定型卡式檢測方法與血凝法比較具有安全可靠,操作簡(jiǎn)單,試驗結果準確,易判斷等優(yōu)點(diǎn)優(yōu)于經(jīng)典的血凝法。
【關(guān)鍵詞】
卡式血型檢測方法 微柱凝膠
隨著(zhù)A B O、R h D血型定型檢測技術(shù)的快速發(fā)展,以及對醫療技術(shù)的要求不斷提高,新的血型檢測方法-卡式檢測方法在國內大中型醫院中迅速應用??ㄊ綑z測方法又稱(chēng)為微柱凝膠免疫檢測技術(shù),在微柱凝膠介質(zhì)中,紅細胞與相應的抗體結合,經(jīng)過(guò)低速離心,凝集的紅細胞懸浮于凝膠中,而未與相應抗體結合的紅細胞沉在管底。
1、材料和方法
1.1、材料
a、 微柱凝膠RhD、ABO血型卡,生理鹽水,LXJ-專(zhuān)用離心機,FYQ孵育器。
b、振蕩儀
c、 ABO血凝法血型正定型檢定卡
1.2、實(shí)驗前準備 將所有的樣品和試劑平衡至室溫。
1.2.1凝膠卡處理 實(shí)驗前,觀(guān)察微柱凝膠卡中是否有汽泡及微柱內壁上是否粘有凝膠,如有則將其離心。
1.2.2、紅細胞懸液配制 取已離心的抗凝血紅細胞10u l加生理鹽水溶液1ml制成1% 的紅細胞懸液。
1.3、凝膠卡操作步驟 (1)撕開(kāi)微柱凝膠配血卡上端的錫紙膜,露出所需檢測的孔數;(2)在A(yíng)、B、RhD孔中分別加入紅細胞懸液50ul; (3)將卡放到L X J-1專(zhuān)用離心機中離心5分鐘;(6)離心結束后在淺色背景下觀(guān)察結果。
1.4、A B O血凝法血型正定型檢定操作步驟 (1)在血型卡上,標明A孔、B孔、D孔,分別加入待檢1% 的紅細胞懸液各一滴;(2)在A(yíng)孔、B孔、D孔中分別加入抗A、抗B、抗D血清各一滴;(3)將卡放到振蕩儀中振蕩混勻1分鐘,采用目視法觀(guān)察結果。
2、卡式法結果判定
(1) 陰性結果:紅細胞完全沉于凝膠管底部,表明受血者與獻血者配血相合。
(2) 陽(yáng)性結果:紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中,表明受血者與獻血者配血不相合。
3、結果
(1)A B O血型定型350例中兩種方法檢測結果完全相同,但其中3例血凝法凝集效價(jià)(++);卡式法凝集效價(jià)(+++);
(2)RhD血型定型350例中兩種方法結果一致。AB O、R hD血型定型卡式檢測方法與血凝法比較具有安全可靠,操作簡(jiǎn)單,試驗結果準確,易判斷等優(yōu)點(diǎn)。
4、討論
A B O、R h D血型定型傳統的方法是血凝法,特點(diǎn)是操作便,設備簡(jiǎn)單,缺點(diǎn)是影響因素多,靈敏度低;目前微柱凝膠免疫檢測技術(shù),在許多發(fā)達國家已經(jīng)作為常規技術(shù)應用于臨床,在A(yíng)B O血型鑒定、R H血型鑒定、不規則抗體檢測、鑒定和交叉配血以及新生兒溶血等檢測項目中廣泛應用,我院于2010年采用了此種血型檢測方法,在實(shí)際應用中取得了較好效果。
卡式血型檢測方法的優(yōu)點(diǎn):
(1) 實(shí)驗全過(guò)程標準化 標準化的孵育時(shí)間、離心時(shí)間以及結果判讀,消除了主觀(guān)因素對弱反應結果的判讀,減少了人為錯誤的發(fā)生;
(2)標本用量少 在卡式血型檢測中,標本用量相對較少,僅需1%紅懸液50ul加入微柱凝膠管,理論最少紅細胞用量?jì)H需0.5u l。
(3)靈敏度和準確性高,重復性好,凝膠管中的凝膠中含有細小微孔,在定時(shí)定轉速條件下僅允許分散紅細胞通過(guò),如紅細胞與所加血清發(fā)生特異性凝集反應,形成紅細胞免疫復合物,則因其體積過(guò)大而不能順利通過(guò)凝膠孔而不能沉集于凝膠底部。
(4)結果易判斷及易標準化 ,卡式血型檢測結果判斷標準明確,凝集的紅細胞,被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央,證明發(fā)生凝集反應;游離的紅細胞,被擠過(guò)裝有過(guò)濾介質(zhì)的小柱,而到達小柱的底部,證明未發(fā)生凝集。
(5)實(shí)驗結果客觀(guān)性強,而且穩定,可以長(cháng)期保存,并可拍照存檔便于復查。
卡式血型檢測法與血凝檢測方法比較,在實(shí)驗的標準化、重復性方面具有更大優(yōu)勢,更適合常規的紅細胞血型血清學(xué)檢測,隨著(zhù)醫學(xué)的不斷發(fā)展及對醫療安全的不斷重視,相信
卡式血型檢測法一定會(huì )廣泛的應用于臨床。